皮膚角質形成細胞的無血清培養方法
writer：章培標，侯立中，侯宜
keywords：角質形成細胞；無血清培養；組織工程；人工皮膚
source：期刊
specific source：黑龍江醫藥, 2003,5：442-445
Issue time：2003年
[論文摘要] 目的：探索建立少量成年自體皮膚角質形成細胞體外無血清培養體系，為自體組織工程皮膚的構建與移植奠定物質基礎。方法：無茵條件下，取2cm×2cm 兔耳皮膚組織塊，Dispase消化，分離真表皮，表皮以胰蛋白酶+EDTA 消化獲得角質形成細胞，以含鈣和不舍鈣的角質形成細胞培養液(K-SFM)，按不同細胞密度接種于24孔板，觀察細胞生長狀況；免疫組化鑒定，MTT法測定不同血清濃度對角質形成細胞增殖分化的影響。結果：在適當的Ca 濃度下，少量自體角質形成細胞能夠在無血清培養液k—SFM 中培養擴增，最多可傳4～6代。添加血清后可明顯加速細胞分化。結論：無血清培養體系適用于少量成年自體角質形成細胞的體外連續培養擴增，培養的細胞可用于自體組織工程皮膚的構建。