作者:章培標(biāo), 侯 宜, 侯立中, 曲福軍, 周余來, 顏煒群, 楊同書
關(guān)鍵字:鈣離子 角質(zhì)形成細(xì)胞, 分化, 人工皮膚,組織工程
論文來源:期刊
具體來源:中華現(xiàn)代皮膚科學(xué)雜志,2004,1(4):289-291
發(fā)表時(shí)間:2004年
[論文摘要]
目的 觀察無血清培養(yǎng)中不同鈣離子濃度對(duì)皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞(Kc)增殖與分化的影響,為角質(zhì)形成細(xì)胞的體外擴(kuò)增和人工表皮形成提供依據(jù)。
方法 取第二代新生兔背皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞,按0.5×104/cm2細(xì)胞密度接種于含不同濃度CaCl2角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)液的96孔板中,培養(yǎng)1周,每日觀察細(xì)胞生長情況,至第7日以MTT法檢測(cè)OD值。
結(jié)果 當(dāng)CaCl2濃度低于5mg/L時(shí),細(xì)胞貼壁增殖緩慢,甚至無法貼壁;濃度為12.5mg/L 時(shí)Kc呈單層快速生長,并能保持較好的表型,是體外Kc培養(yǎng)擴(kuò)增的最適鈣離子濃度;當(dāng)CaCl2的濃度達(dá)到25mg/L時(shí),Kc形成復(fù)層,集落中央出現(xiàn)大量分化程度較高的角化細(xì)胞和角化物,周邊仍存在增殖能力較強(qiáng)的單層Kc,逐漸向四周擴(kuò)展。隨著Ca2+濃度的增高,細(xì)胞角化程度也隨之增高。
結(jié)論 Ca2+濃度對(duì)體外培養(yǎng)的Kc貼壁、增殖、分化等不同階段產(chǎn)生影響,通過控制無血清培養(yǎng)液中Ca2+濃度可以調(diào)控Kc的增殖和分化。