基于小分子識別誘導的蛋白質超分子組裝及表面固定研究
項目類別：國家自然科學基金面上項目
項目編號：21374057
項目規(guī)模：75萬RMB
參與人員：全體研究生
起止日期：2014/01-2017/12
在零污染背景上固定蛋白質具有重要應用意義，但目前采用的化學/物理固定 方法過程復雜，其特異性和靈敏度不能滿足要求。本項目創(chuàng)新性地利用小分子（如 HEPES 和 TCEP）對溶菌酶特異性識別及相轉變的誘導作用，研究建立溶菌酶分子在零污染背景基材表 面的直接固定方法，解決在零污染背景上固定目標蛋白質分子的關鍵核心難題。通過在分子 水平上研究小分子對溶菌酶特異性識別和誘導其相轉變的微觀進程，以及相轉變產物與包括 零污染背景在內的各種表面之間的相互作用，闡明直接固定方法的作用機理。在實現(xiàn)溶菌酶 相轉變產物與零污染背景穩(wěn)定結合的基礎之上，通過生物素標記或溶菌酶與目標蛋白質偶 聯(lián)，研究建立一整套目標生物分子在零污染背景上直接固定的科學方法。該科學方法的建立 擬完全摒棄傳統(tǒng)方法中對零污染背景進行重復活化和鈍化的繁瑣步驟，從而有效解決生物分 子表面固定中的關鍵問題，為從實際復雜體系中高靈敏度鉤釣靶向蛋白質提供科學依據。