˜q‘期åQ?/span>复旦大学丁徏东课题组设计òq‰™€šè¿‡å¾®åŠ å·¥åˆ¶å¤‡äº†å…ähœ‰å¯æ‹‰ä¼¸åŞ貌微¾l“æž„çš„å¾®‹¹æŽ§èŠ¯ç‰‡åQŒåœ¨æ­¤åŸº¼‹€ä¸Šæž„å»ÞZº†¾l†èƒžçš„准三维黏附状态åƈ˜q›è¡Œå¾ªçŽ¯æ‹‰äŽ×刺激ã€?/span>通过不同¾l†èƒžå’Œä¸åŒç»´åº¦çš„研究表明åQŒå‡†ä¸‰ç»´å¾®çŽ¯å¢ƒä»‹äºŽäºŒ¾l´å’Œä¸‰ç»´å¾®çŽ¯å¢ƒï¼Œè€Œä¸”在许多方面，适当的准三维¾l†èƒžå¯ä»¥æ¨¡ä»¿ä¸‰ç»´å¾®çŽ¯å¢ƒä¸­çš„细胞，同时又能像在二维上一æ äh–¹ä¾¿åœ°è§‚察ã€?/span>相关成果以标题äØ“â€?/span>Design and Aligner-assisted Fast Fabrication of a Microfluidic Platform for Quasi-3D Cell Studies on an Elastic Polymerâ€?/span>发表åœ?/span>ã€?/span>Bioactive Materials》。复旦大学高分子¿U‘å­¦¾p…R€èšåˆç‰©åˆ†å­å·¥ç¨‹å›½å®¶é‡ç‚¹å®žéªŒå®¤åšå£«åŽç ”究å‘?/span>è´ø™¿Žå®åšå£?/span>ä¸ø™®ºæ–‡ç¬¬ä¸€ä½œè€…，通讯作者äؓ该国重主ä»?/span>丁徏东教æŽ?/span>。此研究得到国家自然¿U‘学基金½{‰èµ„助支持ã€?/span>

作äؓ体外力学转导的基¼‹€ç ”究模型体系åQŒäºŒ¾l´ç»†èƒžæ‹‰ä¼¸ç ”½I¶ç›¸å¯¹å®¹æ˜“，è€?/span>三维¾l†èƒžæ‹‰äŽ×模拟了细胞在体内的部分状态，可能对生物医学和生物材料研究产生更重要的影响。因此需要徏立一个准三维体外研究模型åQˆå›¾1åQ?/span>åQŒå®ƒæ—¢å¯ä»¥åœ¨ä¸€å®šç¨‹åº¦ä¸Šæ¨¡æ‹Ÿ¾l†èƒžçš„三¾l´è¡Œä¸ºï¼Œåˆå€ŸåŠ©äºŒç»´æ¨¡å¼çš„简单和便利ã€?/span>

å›?/span>1. 本研½I¶çš„基本思èµ\ã€?/span>(A) ¾l†èƒžå“åº”准三¾l´åŠ›å­¦åˆº‹È€çš„示意图ã€?/span>(B) å…ähœ‰æ‹“扑微结构的PDMS膜的刉™€ åŠ¾l„装ã€?/span> 该微‹¹æŽ§èŠ¯ç‰‡åœ°åˆ¶å¤‡å­˜åœ¨è¯¸å¤šéš¾ç‚¹ï¼šé¦–å…ˆåQ?/span>需要进行两‹Æ¡å¯¹å‡†ï¼›å…¶æ¬¡åQ?/span>在对准之后还要立卌™¿›è¡Œç­‰¼›Õd­ä½“é”®å?/span>以免失活åQ?/span>此外åQŒç¡…晶片上的微图案通常难以观察清楚åQŒå¢žåŠ äº†å¯¹å‡†éš‘Öº¦ã€?/span>ä¸ÞZº†è§£å†³˜q™äº›é—®é¢˜åQŒç ”½I¶äh员设计åƈ¾l„装了一¿Uæ–°åž‹çš„芯片快速对准äÈAåQˆå›¾2åQ‰ã€‚凭借该对准仪的预对准程序和有效观察的优点，在等¼›Õd­è¡¨é¢å¤„理后可åœ?/span>1分钟å†?/span>卛_¯å®Œæˆå¯¹å‡†å’Œé”®åˆã€?/span>

å›?/span>2. 本研½I¶å¼€å‘çš„åŸÞZºŽä½“式昑־®é•œçš„快速对准系¾lŸã€?/span>(A)三维拆分¾l“æž„ã€?/span>(B) 快速对准äÈA的原型机。（CåQ?/span>快速对准äÈAçš„ä‹É用实例ã€?/span> å›?/span>3A昄¡¤ºäº†é”®åˆåŽçš„芯片原件。在其右侧显½CÞZº†å¾®äº•é˜µåˆ—成功地组装在微通道中间。该操作的技术难ç‚ÒŽ˜¯å¾®äº•é˜µåˆ—图案åQ?/span>800 μm × 5 mm 的长条）准确地、åã^行地攄¡½®äºŽå¾®é€šé“åQ?/span>1 mm宽）之中。快速对准äÈA有效地解决了该问题。芯片的横截面如å›?/span>3B 所½Cºã€‚弹性膜处在上下两个微通道层之间。两个侧腔中的膜通过 PDMS 蚀åˆÕd‰‚åŽ?/span>除ã€?/span>ç”׃ºŽå¾®é€šé“侧壁¾U?/span>ä¸?/span>100 μmå®?/span>åQŒä¸”ä¸?/span>ã€?/span>下微通道侧壁寚w½è‰¯å¥½åQŒä¼°è®¡å¯¹å‡?/span>¾_‘Öº¦ä¸?/span> ? 10 μm。图3C 昄¡¤ºäº†ç›´å¾„äØ“10 μmã€?/span>25 μmå’?/span>40 μm三种微井阵列çš?SEM 囄¡‰‡ã€?/span>

å›?/span>3. 微流控芯片的¾l“构表征和微柱阵列ã€?/span>(A) 键合有微井阵列的芯片照片。右图显½Cºå¾®äº•é˜µåˆ—åã^行排列在微通道中ã€?/span>(B) 微流控芯片的横截面。右侧是膜上微柱的放大图像ã€?/span>(C) 三种微井阵列çš?/span>SEM囄¡‰‡åQŒå³ž®å¾®äº•ï¼ˆSåQ‰ã€ä¸­å¾®äº•åQ?/span>MåQ‰å’Œå¤§å¾®äº•ï¼ˆLåQ‰ã€?/span>
‹zȝ»†èƒ?/span>çš?/span>拉äŽ×和成像系¾lŸå¦‚å›?/span>4所½Cºã€‚该¾pȝ»Ÿç”±åŽ‹åŠ›æŽ§åˆ¶å™¨ã€æ³¨ž®„æ܇和配备有‹zȝ»†èƒžåŸ¹å…ȝ³»¾lŸçš„荧光昑־®é•œç»„成。通过微柱位移的图像分æž?/span>可知芯片å?/span>åœ?/span> 0-1 Hz 的频çŽ?/span>ã€?/span>0-19%拉äŽ×çŽ?/span>范围å†?/span>ä»ÀL„è°ƒèŠ‚。还å?/span>åœ?/span>2 Hz的频çŽ?/span>ã€?/span>0-13%çš?/span>拉äŽ×率下正常工作ã€?/span>

å›?/span>4 (A) 微流æŽ?/span>拉äŽ×¾pȝ»Ÿã€?/span>(B) 不同拉äŽ×频率下拉ä¼?/span>çŽ?/span>与压力的关系。理论结果代表来自有限元分析的静态拉ä¼?/span>çŽ?/span>ã€?/span>
研究人员对细胞的“类三维”状态进行详¾l†è¡¨å¾â€”ä‹É用共聚焦昑־®é•œèŽ·å–原始细胞的三维数据、通过三维重构来数字化昄¡¤º¾l†èƒžå½¢æ€ï¼Œòq¶ä‹É用球形度来估计细胞åŞ状。图5A展示了通过å…Þpšç„¦æ˜¾å¾®é•œèŽ·å¾—的荧光è{染活¾l†èƒžçŠ¶æ€ã€‚ç ”½I¶äh员发现拓扑微¾l“构可以显著地改变细胞åŞ态：åœ?/span>S中，¾l†èƒžå—到严格¾U¦æŸåQŒå› æ­¤ç»†èƒžè¡¨é¢ç²—¾p™ï¼ˆä½Žçƒå½¢åº¦åQ‰ï¼›åœ?/span>L中，¾l†èƒžæ¾æ•£åœ°é»é™„在微井的底部和侧壁上，呈铺展åŞ态（低球形度åQ‰ï¼›è€Œåœ¨M中，¾l†èƒžé€‚度黏附于微井，因此¾l†èƒž­‘‹äºŽåœ†åÅžåQˆé«˜çƒåŞ度）åQ?/span>F上的¾l†èƒžæ˜¯å››¿UåŸºæ¿ä¸­æœ€òq›_¦çš„（球åŞ度最低）。球度是用三¾l´é‡å»ºçš„数字信息计算的。细胞球度的¾lŸè®¡¾l“果分别ä¸?/span>0.54åQ?/span>SåQ‰ã€?/span>0.65åQ?/span>MåQ‰ã€?/span>0.59åQ?/span>LåQ‰å’Œ0.50åQ?/span>FåQ‰ã€?/span>

å›?/span>5. 微柱ä¸?/span> RFP-hMSC ¾l†èƒžçš„三¾l´è¡¨å¾ã€?/span>(A) 三种微井阵列 (Sã€?/span>M å’?L)中和òq³é¢åQ?/span>FåQ‰ä¸Šçš„细胞åŞ态。从左到右的四行表示四种基板的示意图、共聚焦昑־®é•œå…¸åž‹ç»“果、三¾l´é‡æž„结果、准三维¾l†èƒžé»é™„½Cºæ„å›¾ã€‚在å…Þpšç„¦å›¾ç‰‡ä¸­åQŒçº¢è‰²è¡¨½Cºç”¨RFP标记的活¾l†èƒžåQŒæ˜Žåœø™¡¨½Cºå¾®æŸ±é˜µåˆ—ã€?/span>(B) ¾l†èƒžçš„球åº?(nâ‰?/span>80)ã€?/span> å›?/span> 6A昄¡¤ºäº?/span>在åó@环拉伸（1 HzåQ?/span>10%åQ‰æœŸé—?/span>åQ?/span>RFP-hMSC¾l†èƒžçš?/span>扩散å’?/span>取向发生äº?/span>显著变化。图 6B åˆ?/span>昄¡¤ºäº?/span>¾l†èƒžé“ºå±•å’Œå–å?/span>随时间变化的¾lŸè®¡æ•°æ®ã€‚在拉äŽ×çš?/span>0-2ž®æ—¶å†…，¾l†èƒžåœ?/span>Sã€?/span>Må’?/span>L阵列中的铺展普遍降低åQ?/span>减少5-8%åQ‰ï¼Œè€Œåœ¨òq³é¢åQ?/span>FåQ?/span>上不明显åQˆå‡ž®?/span>~1%åQ‰ã€?/span>可见åQ?/span>一些细èƒ?/span>选择äº?/span>收羃成圆形åƈ黏附在微æŸÞqš„侧壁上以避免物理扰动。在2-10ž®æ—¶å†…，¾l†èƒžçš„铺å±?/span>辑ֈ°½EÏx€ï¼Œé“ºå±•çŽ?/span>分别ä¸?/span>39% (S)ã€?/span>58% (M)ã€?/span>53% (L)å’?/span>76% (F)ã€?/span>

å›?/span>6. RFP-hMSC¾l†èƒžåœ¨åó@环拉伸过½E‹ä¸­çš?/span>铺展å’?/span>取向ã€?/span> (A)循环拉äŽ×后微äº?/span>阵列中细胞的昑־®ç…§ç‰‡ã€‚底部的双箭头表½Cºæ‹‰ä¼¸æ–¹å‘。荧光模式检‹¹‹å¸¦æœ?/span>RFPåQˆçº¢è‰²è§å…‰ï¼‰æ ‡è®°çš„æ´»¾l†èƒžåQ?/span>相差模式观察微柱阵列åQ?/span>图中所昄¡¤ºçš„是合åƈ的图像ã€?/span>åQ?/span>BåQ?/span>¾l†èƒžçš„表è§?/span>铺展çŽ?/span>å’?/span>序参量随拉äŽ×æ—‰™—´å˜åŒ–的结果，å…?/span>中的¾U¢çº¿ä»…用于视觉引å¯?/span>ã€?/span>(C) 循环拉äŽ×çš?/span>二维或准三维材料微环境中¾l†èƒžçŠ¶æ€çš„½Cºæ„å›¾ã€?/span> 拉äŽ×促ä‹É¾l†èƒž˜qç§»å‘生æ ÒŽœ¬æ€§å˜åŒ–。从å›?/span>7åQ?/span>上部åQ‰æ˜¾½Cºçš„单细胞迁¿U»è½¨˜q?/span>可以看出åQŒæ‹‰ä¼¸æ˜¾è‘?/span>改变了细胞迁¿U?/span>模式ã€?/span>可见在拉伸过½E‹ä¸­åQŒç»†èƒžæ„Ÿè§‰åˆ°å¼ºçƒˆçš?/span>力学òq²æ‰°åQ?/span>è€?/span>ä¸ÞZº†é¿å…æ‰°åŠ¨åQ?/span>¾l†èƒžé€‰æ‹©åœ?/span>拉äŽ×çš„åž‚ç›?/span>方向ä¸?/span>˜qç§»ã€‚此外，研究人员用轮å»?/span>˜qç§»é€Ÿåº¦å’Œå‡æ–¹ä½¿U?/span> (MSD) 量化了细胞迁¿U?/span>ã€?/span>轮廓˜qç§»é€Ÿåº¦ç”?/span>˜qç§»é•¿åº¦ ( l ) 除以˜qç§»æ—‰™—´ ( t )得出åQˆè¯¦è§å›¾7左上角示意图åQ?/span>åQ?/span>
(1)

MSD 计算公式�/span>

(2)

或直接通过端到端向é‡?/span>h 计算åQ?/span>

(3)

其中D是扩散系数�/span>

MSD 随拉伸时é—?/span>t¾U¿æ€§å¢žåŠ ã€?/span>表明¾l†èƒž˜qç§»éµåó@¾_’子布朗˜qåŠ¨çš„随机扩散方½E‹ã€‚因此，可以使用 MSD 的结果计½Ž—扩æ•?/span>¾pÀL•°DåQŒå¦‚å›?/span>7ä¸?/span>éƒ?/span>所½Cºã€?/span>不管æ˜?/span>拉äŽ×˜q˜æ˜¯éžæ‹‰ä¼¸æƒ…å†?/span>åQ?/span>微井阵列中细胞的扩散¾pÀL•°å¤§å°™åºåºå‡äØ“ M > L > Sã€?/span>F的扩散率大于微井阵列åQŒå› ä¸ºç»†èƒ?/span>可以在没有微柱障¼„çš„情况下迁¿U…R€‚拉伸和非拉伸的扩散¾pÀL•°åQ?/span>D_{拉äŽ×}/ D_{非拉ä¼?/span>}åQ‰äØ“ S (0.5) < M (0.9) < L (1.6) < F (5.4)åQŒè¿™æ„å‘³ç€æ‹‰äŽ×ä½?/span>Lå’?/span>F中的¾l†èƒž˜qç§»é€Ÿåº¦å˜å¿«åQŒè€Œæ˜¯Så’?/span>M中的¾l†èƒžè¾ƒæ…¢ã€?/span>¾l†èƒžæ‹‰äŽ×在很大程度上影响了细胞迁¿Uȝš„方向。众所周知åQŒé€‚度的细胞黏附可以促˜q›ç»†èƒžè¿¿U…R€‚所以对于åã^坦表é?/span> åQ?/span>FåQ‰å’Œ½E€ç–å¾®æŸ±ï¼ˆLåQ‰æ¥è¯ß_¼Œå¼ºçƒˆçš„力学扰动（10% 拉äŽ× 1 HzåQ‰å¯èƒ½ä¼šå‰Šå¼±¾l†èƒžé»é™„åQŒä»Žè€Œä‹É¾l†èƒžæ›´é€‚合˜qç§»ã€‚至于致密的微柱åQ?/span>Så’?MåQ‰ï¼Œæ‹‰äŽ×可以通过增加¾l†èƒžç‰µå¼•åŠ›æ¥å¢žå¼º¾l†èƒžé»é™„åQŒä»Žè€Œé˜»¼„ç»†èƒžè¿¿U…R€?/span>
RFP-hMSC¾l†èƒžåœ¨å…·æœ‰ä¸åŒæ‹“扑åŞ貌表面的轮廓速度ä¸?/span>V_{拉äŽ×}= 10 ?m h^-1 (S)ã€?/span>29 ?m h^-1 (M)ã€?/span>24 ?m h^-1 (L)ã€?/span>76 ?m h ^-1 (F) å’?/span>V_{非拉ä¼?/span>}= 14 ?m h^-1 (S)ã€?/span>33 ?m h ^-1 (M)ã€?/span>17 ?m h^-1 (L)ã€?/span>35 ?m h^-1 (F)。在循环拉äŽ×下细胞迁¿UÀL˜¾½Cºå‡ºå¾ˆå¼ºçš„方向性ã€?/span>通过计算MSDçš?/span>Xå’?/span>Y分量åQ?/span>MSD _Xå’?/span>MSD _Y åQ‰ï¼Œòq¶å°† MSD _Y / MSD _X定义为方向性，数å€?/span>ä¸?/span> 1.4 (S)ã€?/span>5.1 (M)ã€?/span>3.8 (L) å’?17.2 (F)ã€?/span>

å›?/span>7. 循环拉äŽ× (St.) 和非拉äŽ× (N.St.) 下单个细胞的跟踪路径ã€?/span>图中昄¡¤ºäº†æ¯ä¸ªåŸºæ¿çš„30个细胞轨˜qV€?/span>MSD是根据每1ž®æ—¶˜qç§»è½¨è¿¹çš„端到端距离计算得出的ã€?/span>MSDçš?/span>Xå’?/span>Y分量用于计算˜qç§»çš„方向æ€?/span>ã€?/span>
ä¸ÞZº†æ¸…楚地表征细èƒ?/span>与材料之间的ç›æ€º’联系åQ?/span>研究人员ž®?/span>hMSC¾l†èƒžåŸ¹å…»åœ¨äºŒ¾lß_¼ˆåœ¨åã^é?/span>PDMS上）、准三维åQˆåœ¨PDMS微井中）和三¾lß_¼ˆåœ?MatrigelåQ‰å¾®çŽ¯å¢ƒä¸­ã€‚固定染色后åQŒåœ¨å…Þpšç„¦æ˜¾å¾®é•œä¸‹é€å±‚扫描¾l†èƒžã€‚结果如å›?/span>8所½Cºï¼šé»ç€æ–‘蛋白（vinculinåQ?/span>å’?/span>微丝åQ?/span>F-actinåQ?/span>在所æœ?/span>¾l´åº¦ä¸?/span>都很显著åQŒè¿™è¯´æ˜Ž¾l†èƒžä¸Žææ–™ä¹‹é—´å­˜åœ?/span>明显çš?/span>黏附位点ã€?/span>其中研究人员发现åQ?/span>åœ?/span>三维微环境中的黏着斑蛋ç™?/span>的荧光强度相对较å¼?/span>åQŒè¿™å¯èƒ½æ˜¯ç”±äº?/span>¾l†èƒžä¸ŽèÊY水凝胶的黏附较弱引è“vçš?/span>ã€?/span>

å›?/span>8. å…Þpšç„¦æ˜¾å¾®é•œZ轴层扫的三维叠加图。其中灰色表½Cºææ–™ï¼›¾U¢è‰²è¡¨ç¤ºå¾®ä¸åQ›ç»¿è‰²è¡¨½Cºé»ç€æ–‘蛋白；蓝色表示¾l†èƒžæ ¸ã€‚此处，â€?Dâ€?/span>表示òq›_¦ PDMS 表面上的¾l†èƒžåQ?/span>â€?Dâ€?/span>表示åŸø™´¨èƒ¶ä¸­çš„细胞，â€?/span>quasi-3Dâ€?/span>表示è¢?/span>PDMS微柱包围的微井中的细胞，其中“Sâ€?/span>ã€?/span>“Mâ€?/span>å’?/span>“Lâ€?/span>表示ž®ã€ä¸­ã€å¤§å¾®äº•ã€?/span> ¾l†èƒžåœ?/span>二维和准三维中培å…?/span>4 håQŒåœ¨ä¸‰ç»´ä¸­åŸ¹å…?/span>24 hã€?/span> ä¸ÞZº†è€ƒå¯Ÿä¸åŒ¾l†èƒžå¯¹äºŽä¸‰ç§å¾®çŽ¯å¢ƒçš„响应åQŒå°†ä¸‰ç§¾l†èƒžåœ¨äºŒ¾l´ã€å‡†ä¸‰ç»´å’Œä¸‰¾l´å¾®çŽ¯å¢ƒä¸?/span>的细胞响应。这三种¾l†èƒžåˆ†åˆ«ä¸?/span>hMSCåQˆäh骨髓间充质干¾l†èƒžåQ?/span>ã€?/span>HFFåQˆäh包皮成纤¾l´ç»†èƒžï¼‰ã€?/span>HUVECåQˆäh脐静脉内皮细胞）。需要强调的是，˜q™é‡Œòq?/span>没有动用循环拉äŽ×。图9A所½Cºï¼Œ¾l†èƒžåœ¨äºŒ¾l?/span>微环境中4 hå†?/span>ž®±é“ºå±?/span>良好。但在三¾l?/span>微环å¢?/span>ä¸?/span>ž®½ç®¡åŸ¹å…»24 håQŒç»†èƒ?/span>仍然在基质胶中趋于圆形。在准三¾l?/span>微环å¢?/span>中，¾l†èƒžè¡¨çŽ°å‡ÞZ¸åŒçš„形态：M使细胞比Så’?/span>L膜更圆。图9B昄¡¤ºäº†å®šé‡åˆ†æžçš„¾l“果。圆度确实是二维<å‡?/span>三维<三维。此外，每个¾l†èƒžä¸?/span>黏着斑蛋ç™?/span>的积分强度äؓ二维: 准三¾l?/span>:三维= 5:3:1。因此，准三¾l´å¾®çŽ¯å¢ƒä»‹äºŽäºŒç»´å’Œä¸‰¾l´ä¹‹é—ß_¼Œä¸?/span>相对更接˜q‘三¾l´ã€‚在准三¾lß_¼ˆSã€?/span>M å’?LåQ‰ä¸­åQ?/span>M¾l„在所有三¾cȝ»†èƒžçš„三个斚w¢åQ?/span>微丝、圆度和¾l†èƒžé¢ç§¯åQ‰å‡æ˜„¡¤ºå‡ºæœ€é«˜å€¹{€?/span>

å›?/span>9. 在二¾lß_¼ˆPDMSòq³é¢ä¸Šï¼‰ã€å‡†ä¸‰ç»´åQ?/span>PDMS 微井中）和三¾lß_¼ˆåŸø™´¨èƒ¶ä¸­åQ‰å¾®çŽ¯å¢ƒä¸­åŸ¹å…ȝš„不同¾cÕdž‹çš„细胞ã€?/span>(A) 染色çš?/span>hMSCã€?/span>HFFå’?/span>HUVEC 的荧光显微照片，其中微丝为红è‰ÔŒ¼Œé»ç€æ–‘蛋白äØ“¾l¿è‰²åQŒç»†èƒžæ ¸ä¸ø™“è‰ŒÓ€?/span>(B)二维和准三维¾l†èƒžåŸ¹å…» 4 håQŒä¸‰¾l´ç»†èƒžåŸ¹å…?/span> 24 hå?/span>微丝和黏着斑蛋白的¿U¯åˆ†å¼ºåº¦å’Œç»†èƒžé»é™„参数的¾lŸè®¡¾l“æžœã€?/span>
通过以上研究发现åQŒç»†èƒ?/span>在中½{‰å¾®äº?/span>åQ?/span>MåQ?/span>ä¸?/span>的取向、铺展ã€?/span>˜qç§»å‡æ¯”ž®å¾®äº?/span> (S) 和大微井 (L)é«?/span>。由于细胞球度的™åºåºä¸?/span> M > L > SåQŒç ”½I¶äh员推‹¹‹å‡†ä¸‰ç»´¾l†èƒžé»é™„改变了细胞行为。也ž®±æ˜¯è¯ß_¼ŒM可能充当â€?/span>é€?/span>åº?/span>支架â€?/span>æ?/span>帮助¾l†èƒžé»é™„、重新定向和˜qç§»ã€‚äؓ了进一步阐æ˜?/span>â€?/span>é€?/span>åº?/span>支架â€?/span>˜q™ä¸€æ¦‚念åQŒç ”½I¶äh员将三种¾l†èƒžç”¨èƒ°é…¶æ¶ˆåŒ–之后重悬于¾l„织培养æ?/span> (TCP) 表面20 分钟˜q›è¡Œæ‹æ‘„åQŒèŽ·å¾—清晰的¾l†èƒžæ˜‘Ö¾®é•œç…§ç‰‡ã€‚经˜q‡ç»†èƒžå°ºå¯¸ç»Ÿè®¡ï¼Œç ”究人员得到hMSCã€?/span>HFFå’?/span>HUVEC¾l†èƒžçš„直径分别äØ“16.6?2.5 μmã€?/span>20.7?5.4 μmã€?/span>17.2?2.0 μm。这三种人源¾l†èƒžçš„尺寸确实均落在S微井å’?/span>M微井的直径范围内åQŒå› æ­¤ä¸‰¿Uç±»åž‹çš„¾l†èƒžå?/span>能在˜q›å…¥ä¸­å¾®äº•åŽæ„Ÿåº”到适当的准三维微环境ã€?/span>

å›?/span>10. hMSCã€?/span>HFFã€?/span>HUVEC ¾l†èƒžçš„直径（每组n â‰?100åQ‰ã€‚图像是在细胞接¿Uåˆ°¾l„织培养æ?(TCP) 表面20 分钟后拍摄的。所有细胞的大小介于 S å’?M 微井的直径之间ã€?/span> 该研½I?/span>设计òq¶æˆåŠŸåˆ¶å¤‡äº†å…ähœ‰å¯æ‹‰ä¼¸å¾®¾l“æž„çš„å¾®‹¹æŽ§èŠ¯ç‰‡åQŒåœ¨æ­¤åŸº¼‹€ä¸Šæž„å»ÞZº†¾l†èƒžçš„准三维黏附状态åƈ˜q›è¡Œå¾ªçŽ¯æ‹‰äŽ×刺激。细èƒ?/span>åœ?/span>不同å¾?/span>äº?/span>阵列中的循环拉äŽ×使得¾l†èƒžå‘ˆçŽ°ä¸åŒæ°´åã^的扩散ã€?/span>取向、迁¿U»é€ŸçŽ‡å’Œè¿¿UÀL–¹å‘性ã€?/span>è€?/span>被聚合物微柱包围的中½{‰å¾®äº•å¼•å‘了最强的¾l†èƒžååº”。研½I¶äh员还研究了三¿Uç±»åž‹çš„¾l†èƒžåœ?/span>二维、准三维和三¾l´å¾®çŽ¯å¢ƒä¸­çš„表现åQ›ç»“果证实准三维微环å¢?/span>介于二维和三¾l?/span>微环å¢?/span>åQ?/span>而且在许多方面，适当的准三维¾l†èƒžå¯ä»¥æ¨¡ä»¿ä¸‰ç»´å¾®çŽ¯å¢ƒä¸­çš„细胞，同时又能像在二维上一æ äh–¹ä¾¿åœ°è§‚察。该研究为准三维微环å¢?/span>çš?/span>¾l†èƒžæ‹‰äŽ×提供了有价值的工具åQŒåƈ揭示了生物材料拓扑特征对¾l†èƒžçš„复杂媄响，从而äؓ不同¾l´åº¦çš?/span>¾l†èƒžç ”究开辟了新途径ã€?/span>

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https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2452199X2100582X