私密直播全婐app免费大渔直播,国产av成人无码免费视频,男女同房做爰全过程高潮,国产精品自产拍在线观看

  腫瘤相關(guān)酶敏感前藥（TAEAP）是一類能在腫瘤內(nèi)被特異性激活的藥物。TAEAP被腫瘤組織中過度表達(dá)的酶特異性酶解，釋放活性藥物，發(fā)揮殺傷腫瘤的作用。TAEAP策略能夠提高抗腫瘤藥物的腫瘤選擇性，降低其毒副作用。但是，在很多時候，腫瘤組織內(nèi)可激活TAEAP的酶的表達(dá)水平與正常組織相比差異性不夠明顯，使得TAEAP的腫瘤靶向性不夠高，進(jìn)而限制了TAEAP的腫瘤選擇性和藥效。

  針對腫瘤組織和正常組織內(nèi)可激活TAEAP的酶的量差異性不夠明顯的問題，陳學(xué)思、湯朝暉研究員團(tuán)隊(duì)利用高分子血管阻斷劑（CA4-NPs）選擇性地放大腫瘤組織MMP9的表達(dá)，提高M(jìn)MP9敏感阿霉素前藥納米藥物在腫瘤組織的靶向釋放。因高分子血管阻斷劑能夠選擇性破壞腫瘤血管，而對正常組織無明顯影響，所以可以選擇性地誘導(dǎo)腫瘤組織MMP9表達(dá)水平升高，進(jìn)而促進(jìn)MMP9敏感阿霉素前藥納米藥物在腫瘤組織中的靶向釋放。

圖1.高分子血管阻斷劑選擇性放大腫瘤組織MMP9的表達(dá)，提高M(jìn)MP9敏感阿霉素前藥納米藥物在腫瘤組織中的靶向釋放。

  該團(tuán)隊(duì)通過將阿霉素氨基與MMP9敏感多肽Fmoc-GPLGL上亮氨酸羧基鍵合，制備MMP9敏感阿霉素前藥MMP9-DOX。通過聚乙二醇單甲醚嵌段谷氨酸苯丙氨酸共聚物將MMP9-DOX進(jìn)行擔(dān)載，制備MMP9敏感阿霉素前藥納米藥物MMP9-DOX-NPs。研究團(tuán)隊(duì)對MMP9-DOX和MMP9-DOX-NPs的MMP9酶敏感性進(jìn)行了驗(yàn)證。在體外存在MMP9酶的條件下，經(jīng)高效液相色譜驗(yàn)證MMP9-DOX被酶解為Leu-DOX和Fmoc-GPLG兩個片段，表明MMP9的酶切位點(diǎn)在谷氨酸殘基和亮氨酸殘基之間。MMP9-DOX在存在MMP9酶的條件下被酶解的量高于無MMP9酶的條件下被酶解的量。同時，在細(xì)胞水平上觀察到，MMP9-DOX、MMP9-DOX-NPs在MMP9表達(dá)水平較高的4T1細(xì)胞系上被酶解的量高于在MMP9表達(dá)水平較低的3T3細(xì)胞系上的量。因細(xì)胞內(nèi)含有氨肽酶，被MMP9酶解產(chǎn)生的Leu-DOX被氨肽酶進(jìn)一步酶解，釋放DOX，發(fā)揮殺傷腫瘤細(xì)胞的作用。

圖2.（A）MMP9-DOX的合成路線，MMP9-DOX被MMP9酶解產(chǎn)生的Leu-DOX片段（B）和Fmoc-GPLG片段（C），（D）MMP9-DOX體外酶解釋放曲線，MMP9-DOX與MMP9-DOX-NPs在4T1細(xì)胞系（E）和3T1細(xì)胞系上的酶解釋放分析（F）。

  進(jìn)一步，對CA4-NPs引起腫瘤組織MMP9表達(dá)特異性升高進(jìn)行驗(yàn)證。通過對4T1腫瘤模型給與不同藥物治療48 h后，分析腫瘤組織MMP9的表達(dá)。觀察到，給與CA4-NPs后，腫瘤組織MMP9表達(dá)顯著升高，而正常組織MMP9表達(dá)無顯著變化。通過分析得出，CA4-NPs治療破壞腫瘤組織血管，引起腫瘤組織乏氧是導(dǎo)致腫瘤組織MMP9表達(dá)水平升高的重要因素。因此分別研究在常氧和乏氧條件下4T1細(xì)胞MMP9的表達(dá)水平，觀察到4T1細(xì)胞在乏氧條件下MMP9表達(dá)顯著升高。這一結(jié)果驗(yàn)證了乏氧條件是影響腫瘤組織MMP9表達(dá)的重要因素。

圖3.（A）免疫熒光染色法分析腫瘤組織MMP9的表達(dá)。（B）免疫熒光染色定量分析腫瘤組織MMP9的表達(dá)。（C）Western blot法分析腫瘤組織MMP9的表達(dá)。（D）Western blot法定量分析腫瘤組織MMP9的表達(dá)。（E）免疫熒光染色定量分析正常組織MMP9的表達(dá)。（F）Western blot法分析不同培養(yǎng)條件下4T1細(xì)胞MMP9的表達(dá)。（G）Western blot法定量分析不同培養(yǎng)條件下4T1細(xì)胞MMP9的表達(dá)。

  基于以上的研究，設(shè)計(jì)在動物水平考察CA4-NPs與MMP9-DOX-NPs聯(lián)合治療策略對MMP9-DOX-NPs腫瘤靶向釋放的影響，及對腫瘤的治療效果。結(jié)果表明，在4T1原位腫瘤模型上，CA4-NPs與MMP9-DOX-NPs聯(lián)用組腫瘤組織內(nèi)DOX的釋放量是MMP9-DOX-NPs對比組的3.7倍。同時在正常組織中，兩組DOX的釋放量無顯著性差異。說明CA4-NPs能夠有效的促進(jìn)MMP9-DOX-NPs在腫瘤組織的靶向釋放。在4T1原位腫瘤模型和C26皮下模型中，CA4-NPs與MMP9-DOX-NPs聯(lián)用組表現(xiàn)出較好的腫瘤抑制作用，說明該治療策略可以有效提高腫瘤組織相關(guān)酶敏感前藥的腫瘤治療效果。

圖4.（A）腫瘤組織中游離DOX的量，（B）正常組織中游離DOX的量，4T1原位腫瘤模型的抑瘤曲線（C）腫瘤抑制率（D），小鼠體重變化曲線（E），（F）C26皮下腫瘤模型的抑瘤曲線。

  以上相關(guān)成果發(fā)表在Advanced Materials (Adv.Mater. 2019,1904278)上。論文的第一作者為中國科學(xué)院長春應(yīng)用化學(xué)研究所在讀博士生姜健，共同第一作者為中國科學(xué)院長春應(yīng)用化學(xué)研究所助理研究員沈娜，通訊作者為湯朝暉研究員，共同通訊作者為美國加州大學(xué)洛杉磯分校顧臻教授與陳學(xué)思研究員。

  論文連接：https://doi.org/10.1002/adma.201904278