私密直播全婐app免费大渔直播,国产av成人无码免费视频,男女同房做爰全过程高潮,国产精品自产拍在线观看

  腫瘤細胞與免疫細胞之間的交互作用是腫瘤免疫微環境的核心。雖然腫瘤細胞對免疫細胞的調節作用在大多情況下是為了建立免疫抑制微環境從而實現免疫逃逸，但是在某些特定條件下的腫瘤細胞死亡（如免疫原性死亡，immungentic cell death）則能促進免疫細胞對腫瘤細胞的識別而激活特異性抗腫瘤免疫響應。因此，靶向放大腫瘤細胞的免疫原性死亡成為腫瘤治療的重要方向。目前，只有一些治療手段如光動力治療、放療、以及某些小分子細胞毒性藥物能夠通過增加細胞內的內質網應激壓力引起細胞的免疫原性死亡。然而，光動力治療和放療等手段需要借助外加刺激實施，主要適合淺表腫瘤的治療；而小分子細胞毒性藥物缺乏特異性，對免疫細胞和正常細胞具有同樣的殺傷作用，影響免疫系統的功能發揮。因此，發展利用腫瘤微環境特征特異性觸發腫瘤細胞免疫原性死亡的治療方法對于腫瘤免疫治療的實施具有重要意義。

  基于上述考慮，中國科學院長春應用化學研究所陳學思院士團隊以聚合物分子工程理念為指引，結合Passerini三組分反應和銅催化的Huisgen環加成反應，在長循環載體材料聚（L-谷氨酸）-接枝-聚（乙二醇）單甲醚上引入增強氧化應激功能模塊，設計制備了腫瘤特異性增強氧化應激高分子共軛物（Tumor Specific Enhanced Oxidative stress Polymer conjugate，TSEOP），用于激活腫瘤特異性抗腫瘤免疫響應。該兩親性TSEOP能夠自組裝成納米膠束，在血液中具有長循環能力和腫瘤富集能力。當到達腫瘤組織并被腫瘤細胞攝取后，TSEOP能夠在腫瘤特異生理條件刺激下，降解產生肉桂醛（CA）和醌甲基化合物（QM），分別作為活性氧（ROS）產生器和谷胱甘肽（GSH）的消除器，協同增進腫瘤細胞內的氧化應激和內質網壓力，引起細胞的免疫原性死亡，并激活后續的特異性抗腫瘤免疫響應（圖1）。

圖1. TSEOP的合成及其用于誘導腫瘤細胞發生免疫原性死亡并激活特異性抗腫瘤免疫響應的示意圖。

  體外實驗中，TSEOP處理CT26腫瘤細胞能夠引起細胞內ROS水平顯著升高以及GSH水平的降低，引起腫瘤細胞的凋亡。而在相同條件下，TSEOP對正常細胞的毒性明顯低于腫瘤細胞。TSEOP對腫瘤細胞與正常細胞的毒性差異可能有兩個原因：（1）TSEOP的腫瘤特異性敏感設計使其在正常細胞中釋放CA和QM的速度慢于腫瘤細胞；（2）正常細胞對氧化應激的敏感性一般不如腫瘤細胞。進一步，他們發現TSEOP的處理可以引起CT26腫瘤細胞內高遷移率族蛋白B1（HMGB1）和ATP的釋放，增加腫瘤細胞表面鈣網蛋白（CRT）的暴露。上述三要素的改變證明了細胞免疫原性死亡的發生。而用TSEOP處理的腫瘤細胞上清加入小鼠骨髓來源樹突狀細胞（BMDCs）后，BMDCs中CD80陽性的比例明顯升高，表明樹突狀細胞能夠被有效激活（圖2）。以上結果表明，TSEOP治療能有效誘導腫瘤細胞的免疫原性死亡并刺激抗原提呈細胞的活化。

圖2.（A-B）不同藥物處理后腫瘤細胞內ROS染色及定量結果。（C）不同藥物處理后腫瘤細胞內HMGB-1測試。（D）不同藥物處理后腫瘤細胞培養基中ATP含量。（E）流式細胞術檢測經過不同藥物處理后腫瘤細胞的CRT陽性比例。（F）體外BMDCs刺激實驗及CD80陽性結果。

  在體內治療實驗中，單獨使用TSEOP治療即可非常有效地抑制腫瘤生長，在CT26和4T1兩種小鼠腫瘤模型上都取得了100%的腫瘤抑制率，實現了腫瘤的治愈。對治療后的腫瘤組織進行分析發現，TSEOP的治療可以顯著地提高腫瘤內的CD4⁺和CD8⁺T細胞的含量，顯著地提高活化的樹突狀細胞的比例，表明TSEOP治療可以有效地激活獲得性免疫。此外，腫瘤內巨噬細胞的組成也發生了改變，TSEOP治療組M1/M2巨噬細胞比例增加，表明TSEOP的治療也引起了腫瘤微環境的改變（圖3）。

圖3. （A-B）不同藥物治療后，CT26腫瘤的腫瘤體積曲線。（C-D） 不同藥物治療后，4T1腫瘤的腫瘤體積曲線。（E）不同藥物治療后，CT26腫瘤組織中免疫細胞含量的變化。

  為了證明TSEOP激活了體內腫瘤特異性的抗腫瘤免疫響應，他們在CT26模型上進行了疫苗接種和再挑戰實驗。他們利用經TSEOP預處理的CT26細胞（TSEOP-CT26細胞）作為疫苗對BALB/c小鼠進行了兩次皮下免疫，之后再次種植同種小鼠CT26細胞， 6只小鼠中有4只并沒有形成腫瘤。而利用PBS或者未經TSEOP處理的CT26細胞對小鼠進行免疫則沒有抑制腫瘤形成的作用（圖4）。以上結果證實，TSEOP治療能有效激活腫瘤特異性的抗腫瘤免疫響應，進而有效抑制腫瘤的生長和復發。

圖4. （A） 疫苗接種和再挑戰實驗設計。（B-C）小鼠接受不同疫苗接種后，再挑戰腫瘤的腫瘤體積曲線。

  以上研究結果近期發表在Nano Letters上，中科院長春應化所博士生馬勝為論文的第一作者，宋萬通副研究員和陳學思院士為論文的共同通訊作者。該研究工作得到國家自然科學基金、科技部、吉林省科技發展計劃項目，以及復旦大學聚合物分子工程國家重點實驗室開放課題的支持。

  論文鏈接https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.nanolett.9b05265

  DOI：10.1021/acs.nanolett.9b05265